Qual è il metodo migliore?
—Test per la diagnosi di infezione da SARS-CoV-2
Per i casi confermati di COVID-19, i sintomi clinici riportati includono febbre, tosse, mialgia o affaticamento.Eppure questi sintomi non sono caratteristiche uniche di COVID-19 perché questi sintomi sono simili a quelli di altre malattie infettate da virus come l'influenza.Attualmente, la PCR in tempo reale dell'acido nucleico del virus (rt-PCR), l'imaging TC e alcuni parametri ematologici sono gli strumenti principali per la diagnosi clinica dell'infezione.Molti kit di test di laboratorio sono stati sviluppati e utilizzati per testare campioni di pazienti per COVID-19 dal CDC cinese1, CDC statunitense2e altre società private.Il test degli anticorpi IgG/IgM, un metodo di test sierologico, è stato aggiunto anche come criterio diagnostico nella versione aggiornata in Cina delle linee guida per la diagnosi e il trattamento della nuova malattia da coronavirus (COVID-19), pubblicata il 3 marzo1.Il test rt-PCR dell'acido nucleico del virus è ancora l'attuale metodo diagnostico standard per la diagnosi di COVID-19.
Passo Forte®Novel Coronavlrus (SARS-COV-2) Multiplex Real-Time PCR Kit (rilevamento di tre geni)
Eppure questi kit di test PCR in tempo reale, alla ricerca del materiale genetico del virus, ad esempio nei tamponi nasali, orali o anali, presentano molte limitazioni:
1) Questi test hanno tempi lunghi e sono complicati nel funzionamento;generalmente impiegano in media dalle 2 alle 3 ore per generare risultati.
2) I test PCR richiedono laboratori certificati, apparecchiature costose e tecnici addestrati per funzionare.
3) Ci sono alcuni numeri di falsi negativi per rt-PCR di COVID-19.Potrebbe essere dovuto alla bassa carica virale SARS-CoV-2 nel campione di tampone respiratorio superiore (il nuovo coronavirus infetta principalmente le vie respiratorie inferiori, come gli alveoli polmonari) e il test non può identificare le persone che hanno subito un'infezione, guarite e cancellato il virus dai loro corpi.
Ricerca di Lirong Zou et al4hanno scoperto che sono state rilevate cariche virali più elevate subito dopo l'insorgenza dei sintomi, con cariche virali più elevate rilevate nel naso rispetto alla gola e il modello di diffusione dell'acido nucleico virale dei pazienti infetti da SARS-CoV-2 assomiglia a quello dei pazienti con influenza4e appare diverso da quello osservato nei pazienti infetti da SARS-CoV-2.
Yang Pan et al5ha esaminato campioni seriali (tamponi faringei, espettorato, urina e feci) di due pazienti a Pechino e ha scoperto che la carica virale nei campioni di tampone faringeo e di espettorato ha raggiunto il picco a circa 5-6 giorni dopo l'insorgenza dei sintomi, i campioni di espettorato generalmente hanno mostrato cariche virali più elevate rispetto a campioni di tampone faringeo.Nessun RNA virale è stato rilevato nelle urine o nei campioni di feci di questi due pazienti.
Il test PCR dà un risultato positivo solo quando il virus è ancora presente.I test non possono identificare le persone che hanno subito un'infezione, si sono riprese e hanno eliminato il virus dai loro corpi.In realtà, solo il 30%-50% circa è risultato positivo alla PCR in pazienti con nuova polmonite da coronavirus diagnosticata clinicamente.Molti nuovi pazienti con polmonite da coronavirus non possono essere diagnosticati a causa del test dell'acido nucleico negativo, quindi non possono ottenere il trattamento corrispondente in tempo.Dalla prima alla sesta edizione delle linee guida, basandosi esclusivamente sulla base della diagnosi dei risultati del test dell'acido nucleico, che ha causato grandi problemi ai medici. Il primo "informatore", il dottor Li Wenliang, un oculista al Wuhan Central Ospedale, è morto.Durante la sua vita, ha avuto tre test dell'acido nucleico in caso di febbre e tosse e l'ultima volta ha ottenuto risultati positivi alla PCR.
Dopo la discussione da parte di esperti, è stato deciso di aumentare i metodi di analisi del siero come nuovo criterio diagnostico.Mentre i test anticorpali, chiamati anche test sierologici, possono confermare se qualcuno è stato infettato anche dopo che il suo sistema immunitario ha eliminato il virus che causa COVID-19.
Test rapido per anticorpi IgG/IgM StrongStep® SARS-COV-2
Il test degli anticorpi IgG/IgM aiuterà a tracciare in modo molto più basato sulla popolazione chi ha avuto l'infezione, perché molti casi sembrano essere diffusi da pazienti asintomatici che non possono essere identificati facilmente.Una coppia a Singapore, il marito è risultato positivo alla PCR, il risultato del test PCR di sua moglie era negativo, ma i risultati del test anticorpale hanno mostrato che lei aveva gli anticorpi, così come suo marito.
I test sierologici devono essere accuratamente convalidati per essere sicuri che reagiscano in modo affidabile, ma solo agli anticorpi contro il nuovo virus.Una preoccupazione era che la somiglianza tra i virus che causano la sindrome respiratoria acuta grave e il COVID-19 potesse portare a una reattività crociata.L'IgG-IgM sviluppato da Xue Feng wang6è stato considerato utilizzabile come test point-of-care (POCT), poiché può essere eseguito vicino al letto del paziente con sangue prelevato dal polpastrello.Il kit ha una sensibilità dell'88,66% e una specificità del 90,63%.Tuttavia, c'erano ancora risultati falsi positivi e falsi negativi.
Nella versione aggiornata della Cina delle linee guida per la diagnosi e il trattamento della nuova malattia da coronavirus (COVID-19)1, i casi confermati sono definiti come casi sospetti che soddisfano uno qualsiasi dei seguenti criteri:
(1) Campioni delle vie respiratorie, campioni di sangue o feci sono risultati positivi per l'acido nucleico SARS-CoV-2 mediante rt-PCR;
(2) Il sequenziamento genetico del virus da campioni di campioni di vie respiratorie, sangue o feci è altamente omologa con il noto SARS-CoV-2;
(3) L'anticorpo IgM specifico per il nuovo coronavirus sierico e l'anticorpo IgG erano positivi;
(4) L'anticorpo IgG sierico specifico del coronavirus modificato da negativo a positivo o l'anticorpo IgG specifico del coronavirus durante il periodo di recupero è 4 volte superiore a quello durante il periodo acuto.
Diagnosi e trattamento del COVID-19
| Linee guida | Pubblicato | Criteri diagnostici confermati |
| Versione 7a | 3 marzo 2020 | ❶ PCR ❷ NGS ❸ IgM+IgG |
| Versione 6a | 18 febbraio 2020 | ❶ PCR ❷ NGS |
Riferimento
1. Linee guida per la diagnosi e il trattamento della polmonite da nuovo coronavirus (versione di prova 7, Commissione sanitaria nazionale della Repubblica popolare cinese, pubblicata il 3 marzo 2020)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/a31191442e29474b98bfed5579d5af95.shtml
2. La ricerca utilizza solo il protocollo RT-PCR in tempo reale per l'identificazione di 2019-nCoV
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-detection-instructions.html
3. Singapore rivendica il primo utilizzo del test anticorpale per monitorare le infezioni da coronavirus
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-use-antibody-test-track-coronavirus-infections
4.Carica virale SARS-CoV-2 nei campioni respiratori superiori di pazienti infetti 19 febbraio 2020 DOI: 10.1056/NEJMc2001737
5.Cariche virali di SARS-CoV-2 in campioni clinici Lancet Infect Dis 2020 Pubblicato online il 24 febbraio 2020 (https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30113-4)
6. Sviluppo e applicazione clinica di un test rapido di anticorpi combinati IgM-IgG per SARS-CoV-2
Diagnosi di infezione XueFeng Wang ID ORCID: 0000-0001-8854-275X
Tempo di pubblicazione: 17-mar-2020
