Qual è il metodo migliore?
—Testi per la diagnosi di infezione SARS-COV-2
Per i casi di Covid-19 confermati, i sintomi clinici comuni includono febbre, tosse, mialgia o affaticamento. Tuttavia, questi sintomi non sono caratteristiche uniche di Covid-19 perché questi sintomi sono simili a quelli di altre malattie infette da virus come l'influenza. Attualmente, la PCR in tempo reale dell'acido nucleico virus (RT-PCR), l'imaging CT e alcuni parametri di ematologia sono gli strumenti primari per la diagnosi clinica dell'infezione. Molti kit di test di laboratorio sono stati sviluppati e utilizzati per testare i campioni di pazienti per Covid-19 da CDC cinese1, US CDC2e altre società private. Il test anticorpo IgG/IGM, un metodo di test sierologica, è stato anche aggiunto come criteri diagnostici nella versione aggiornata della diagnosi e delle linee guida per il trattamento della diagnosi e del trattamento per la nuova malattia di Coronavirus (Covid-19), che è stata emessa il 3 marzo1. Il test RT-PCR di acido nucleico virus è ancora l'attuale metodo diagnostico standard per la diagnosi di Covid-19.
Strongstep®Nuovo kit PCR multiplex in tempo reale di Coronavlrus (SARS-CoV-2) (rilevamento per tre geni)
Eppure questi kit di test PCR in tempo reale, alla ricerca di materiale genetico del virus, ad esempio in tamponi nasali, orali o anali, soffrono di molte limitazioni:
1) Questi test hanno lunghi tempi di consegna e sono complicati durante il funzionamento; Generalmente impiegano in media oltre 2-3 ore per generare risultati.
2) I test della PCR richiedono laboratori certificati, attrezzature costose e tecnici addestrati per operare.
3) Ci sono alcuni numeri di falsi negativi per RT-PCR di Covid-19. Può essere dovuto al basso carico virale SARS-CoV-2 nel campione di tampone respiratorio superiore (nuovo coronavirus infetta principalmente il tratto respiratorio inferiore, come gli alveoli polmonari) e il test non può identificare le persone che hanno attraversato un'infezione, recuperate e ha eliminato il virus dai loro corpi.
Ricerca di Lirong Zou et al.4scoperto che sono stati rilevati carichi virali più elevati subito dopo l'insorgenza dei sintomi, con carichi virali più elevati rilevati nel naso rispetto alla gola e il modello di spargimento di acido nucleico virale dei pazienti infetti da SARS-CoV-2 ricorda quello dei pazienti con influenza4e appare diverso da quello visto nei pazienti infettati da SARS-CoV-2.
Yang Pan et al.5Campioni seriali esaminati (tamponi della gola, espettorato, urina e feci) da due pazienti a Pechino e hanno scoperto che i carichi virali nei campioni di tampone e espettorato della gola hanno raggiunto il picco a circa 5-6 giorni dopo l'insorgenza dei sintomi, i campioni di espettorato hanno generalmente mostrato carichi virali più elevati rispetto a campioni di tampone gola. Nessun RNA virale è stato rilevato nei campioni di urina o feci di questi due pazienti.
Il test PCR fornisce un risultato positivo solo quando il virus è ancora presente. I test non sono in grado di identificare le persone che hanno attraversato un'infezione, si sono ripresi e hanno eliminato il virus dai loro corpi. A proposito, solo circa il 30% -50% è stato positivo per la PCR nei pazienti con nuova polmonite da coronavirus clinicamente. Molti nuovi pazienti con polmonite da coronavirus non possono essere diagnosticati a causa del test di acido nucleico negativo, quindi non possono ottenere il trattamento corrispondente in tempo. Dalla prima alla sesta edizione delle Linee guida, basandosi esclusivamente sulla base della diagnosi dei risultati dei test di acido nucleico, che ha causato grandi problemi ai medici. Il primo "fischio", il dott. Li Wenliang, un oftalmologo di Wuhan Central Ospedale, è morto. Durante la sua vita, ha avuto tre test di acido nucleico nel caso della febbre e della tosse, e l'ultima volta che ha ottenuto risultati positivi alla PCR.
Dopo la discussione degli esperti, è stato deciso di aumentare i metodi di test sierica come nuovo criterio diagnostico. Mentre i test anticorpali, chiamati anche test sierologici, ciò può confermare se qualcuno è stato infettato anche dopo che il loro sistema immunitario ha eliminato il virus che causa Covid-19.
Strongstep® SARS-CoV-2 IgG/IGM Anticorpo Rapid Test
Il test degli anticorpi IgG/IGM aiuterà a tracciare in un modo molto più basato sulla popolazione che ha avuto l'infezione, perché molti casi sembrano essere diffusi da pazienti asintomatici che non possono essere identificati facilmente. Una coppia a Singapore, il marito è risultato positivo dalla PCR, il risultato del test della PCR di sua moglie è stata negativa, ma i risultati del test degli anticorpi hanno mostrato che aveva anticorpi, così come suo marito.
I test sierologici devono essere attentamente validati per essere sicuri che reagiscono in modo affidabile, ma solo agli anticorpi contro il nuovo virus. Una preoccupazione era che la somiglianza tra i virus che causano una grave sindrome respiratoria acuta e Covid-19 potesse portare a reattività crociata. L'IGG-IGM sviluppato da Xue Feng Wang6è stato considerato in grado di essere usato come test del punto di cura (POCT), in quanto può essere eseguito vicino al capezzale con il sangue di punta. Il kit ha una sensibilità dell'88,66% e una specificità del 90,63%. Tuttavia, c'erano ancora risultati falsi positivi e falsi negativi.
Nella versione aggiornata della Cina delle linee guida per la diagnosi e il trattamento per la nuova malattia del coronavirus (Covid-19)1, i casi confermati sono definiti come casi sospetti che soddisfano uno dei seguenti criteri:
(1) campioni di tratto respiratorio, campioni di sangue o feci sono risultati positivi per l'acido nucleico SARS-CoV-2 usando RT-PCR;
(2) il sequenziamento genetico del virus da campioni di tratto respiratorio, sangue o campioni di feci è altamente omologa con il noto SARS-CoV-2;
(3) anticorpo IgM specifico per coronavirus sierico e anticorpo IgG erano positivi;
(4) L'anticorpo IgG specifico per coronavirus sierico è cambiato da un anticorpo IgG negativo a positivo o coronavirus durante il periodo di recupero è 4 volte superiore a quello durante il periodo acuto.
Diagnosi e trattamento di Covid-19
| Linee guida | Pubicato | Criteri diagnostici confermati |
| Versione 7 ° | 3MAR.2020 | ❶ PCR ❷ ngs ❸ igm+igg |
| Versione 6 ° | 18 febbraio 2020 | ❶ PCR ❷ ngs |
Riferimento
1. Linee guida per la diagnosi e il trattamento della nuova polmonite da coronavirus (processo 7, National Health Commission of the People's Republic of China, emesso a 3. Mar.2020)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/a31191442e29474b98bfed5579d5af95.shtml
2. Utilizzare la ricerca solo protocollo RT-PCR in tempo reale per l'identificazione del 2019-NCOV
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-tetection-instructions.html
3. Singapore afferma il primo utilizzo del test anticorpale per tracciare le infezioni da coronavirus
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-use-antibody-test-track-coronavirus-infections
4.SARS-COV-2 Carico virale negli esemplari respiratori superiori di pazienti infetti 19.2020 DOI: 10.1056/NEJMC2001737
5.ViRalloads di SARS-COV-2 in campioni clinici Lancet Infect Dis 2020 pubblicato online il 24 febbraio 2020 (https://doi.org/10.1016/s1473-3099(20)30113-4)
6. Sviluppo e applicazione clinica di un rapido test di anticorpi combinati IgM-IgG per SARS-CoV-2
Diagnosi di infezione Xuefeng Wang Orcid ID: 0000-0001-8854-275x
Post Time: mar-17-2020
