Nuovo Kit PCR multiplex in tempo reale del coronavirus (SARS-Cov-2)
Questo kit PCR altamente sensibile e pronto all'uso è disponibile in formato liofilizzato (processo di liofilizzazione) per la conservazione a lungo termine. Il kit può essere trasportato e conservato a temperatura ambiente ed è stabile per un anno. Ogni tubo di Premix contiene tutti i reagenti necessari per l'amplificazione della PCR, tra cui substrasi inversa, TAQ polimerasi, primer, sonde e substrati DNTPS. È necessario solo aggiungere 13ul di acqua distillata e modello di RNA estratto 5ul, quindi può essere eseguito e amplificato sugli strumenti PCR.
La macchina QPCR dovrebbe soddisfare i seguenti requisiti:
1. Fit 8 Strip PCR Tubo Volume 0,2 ml
2. Hanno più di quattro canali di rilevamento:
Canale | Eccitazione (NM) | Emissione (NM) | Coloranti pre-calibrati |
1. | 470 | 525 | Fam, Sybr Green I |
2 | 523 | 564 | Vic, Hex, Tet, Joe |
3. | 571 | 621 | Rox, Texas-Red |
4 | 630 | 670 | Cy5 |
PCR-Platforms:
Sistema PCR a tempo 750000, Biorad CF96, Sistema di rilevamento PCR in tempo reale ICCLER IQ ™, Stratagene MX3000P, MX3005P
La difficoltà del trasporto della catena del freddo del nuovo reagente di rilevamento dell'acido nucleico del coronavirus
Quando i reagenti convenzionali di rilevamento dell'acido nucleico vengono trasportati a lunga distanza, per garantire che il (-20 ± 5) lo stoccaggio e il trasporto della catena del freddo siano necessari per garantire il bioattivo dell'enzima nei reagenti. Per assicurarsi che la temperatura raggiunga lo standard, sono necessari diversi chilogrammi di ghiaccio secco per ogni scatola di reagente di test di acido nucleico anche meno di 50 g, ma può durare solo per due o tre giorni. Sul punto di vista della pratica del settore, il peso effettivo dei reagenti emessi dai produttori è inferiore al 10% (o molto inferiore a questo valore) del contenitore. La maggior parte del peso proviene da ghiaccio secco, pacchetti di ghiaccio e scatole di schiuma, quindi il costo del trasporto è estremamente elevato.
Nel marzo 2020, Covid-19 iniziò a scoppiare su larga scala all'estero e la domanda di un nuovo reagente di rilevamento dell'acido nucleico del coronavirus aumentava drammaticamente. Nonostante l'alto costo di esportazione dei reagenti nella catena del freddo, la maggior parte dei produttori può ancora accettarlo a causa della grande quantità e dell'alto profitto.
Tuttavia, con il miglioramento delle politiche nazionali di esportazione per i prodotti anti-pandemici, nonché l'aggiornamento del controllo nazionale sul flusso di persone e logistica, vi è estensione e incertezza nel tempo di trasporto dei reagenti, il che ha provocato importanti problemi di prodotto causati dal trasporto. Il tempo di trasporto prolungato (il tempo di trasporto di circa mezzo mese è molto comune) porta a frequenti guasti del prodotto quando il prodotto raggiunge il cliente. Ciò ha turbato la maggior parte dei reagenti di acido nucleico Export Enterprises.
La tecnologia liofilizzata per il reagente PCR ha aiutato il trasporto di nuovi reagenti di rilevamento dell'acido nucleico del coronavirus in tutto il mondo
I reagenti PCR liofilizzati possono essere trasportati e conservati a temperatura ambiente, il che non solo può ridurre i costi di trasporto, ma anche evitare i problemi di qualità causati dal processo di trasporto. Pertanto, la liofilizzazione del reagente è il modo migliore per risolvere il problema del trasporto di esportazione.
La liofilizzazione prevede il congelamento di una soluzione in uno stato solido, quindi sublimando e separa il vapore acqueo in condizioni di vuoto. Il soluto essiccato rimane nel contenitore con la stessa composizione e attività. Rispetto ai reagenti liquidi convenzionali, il nuovo reagente di rilevamento dell'acido nucleico del coronavirus liofilizzato a pieno componente prodotto dalla bio calmante ha le seguenti caratteristiche:
Stabilità del calore estremamente forte:Può con un trattamento per stand a 56 ℃ per 60 giorni e la morfologia e le prestazioni del reagente rimangono invariate.
Riproduzione e trasporto normali di temperatura:Non è necessario per la catena del freddo, non è necessario conservare a bassa temperatura prima di non saldare, rilasciare completamente lo spazio di conservazione a freddo.
Pronto per l'uso:La liofilizzazione di tutti i componenti, non è necessaria la configurazione del sistema, evitando la perdita di componenti con elevata viscosità come l'enzima.
Target multiplex in un tubo:L'obiettivo di rilevamento copre il nuovo gene del coronavirus Orf1ab, gene N, gene S per evitare la genovariazione del virus. Al fine di ridurre i falsi negativi, il gene RNase P umano viene utilizzato come controllo interno, in modo da soddisfare la necessità clinica di controllo della qualità del campione.